動(dòng)物源性DNA檢測(cè)試劑盒是為專(zhuān)業(yè)的高通量實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的，但是現(xiàn)在這種試劑盒是適合中低等通量的實(shí)驗(yàn)室使用，這個(gè)試劑盒專(zhuān)門(mén)為每天需要制備的樣品量達(dá)到100個(gè)的實(shí)驗(yàn)室而設(shè)計(jì)。
該試劑盒在連接探針末段引入不同長(zhǎng)度的標(biāo)簽序列，獲得長(zhǎng)度各異的目的探針連接產(chǎn)物，利用熒光標(biāo)記的通用引物對(duì)連接產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過(guò)熒光毛細(xì)管電泳對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離檢測(cè)，后通過(guò)對(duì)電泳圖譜的分析獲取各個(gè)位點(diǎn)的峰高，進(jìn)而對(duì)樣品目的區(qū)域的拷貝數(shù)進(jìn)行分析。
動(dòng)物源性DNA檢測(cè)試劑盒的滲透壓很低(<20mosm/kgH2O),粘度也很小，可形成高達(dá)1.3g/ml密度，采用預(yù)先形成的密度梯度時(shí)可在低離心力(200～1000g)于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)達(dá)到滿意的細(xì)胞分離結(jié)果。由于Percoll擴(kuò)散常數(shù)低，所形成的梯度十分穩(wěn)定。此外，不穿透生物膜，對(duì)細(xì)胞無(wú)毒害，因此廣泛用于分離細(xì)胞、亞細(xì)胞成分、細(xì)菌及病毒，還可將受損細(xì)胞及其碎片與完好的活細(xì)胞分離。
整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格分在三區(qū)進(jìn)行：PCR反應(yīng)體系的配制區(qū)；標(biāo)本處理、加樣區(qū)；PCR擴(kuò)增、熒光檢測(cè)及結(jié)果分析區(qū)。各區(qū)使用的儀器、設(shè)備、耗材和工作服應(yīng)獨(dú)立。實(shí)驗(yàn)后即請(qǐng)清潔工作臺(tái)，并進(jìn)行消毒。
使用不含熒光物質(zhì)的一次性手套(經(jīng)常替換)、一次性離心管、自卸式移液器和帶濾嘴吸頭。
每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)設(shè)置陰陽(yáng)性對(duì)照品，試劑準(zhǔn)備和標(biāo)本處理應(yīng)使用超凈工作臺(tái)(負(fù)壓式)或防污染罩，以防止對(duì)環(huán)境污染。
操作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)，具有一定經(jīng)驗(yàn)和操作技能。
操作臺(tái)、移液器、離心機(jī)、PCR擴(kuò)增儀等儀器設(shè)備應(yīng)經(jīng)常用10％次氯酸或70％酒精、紫外線燈或臭氧消毒處理。
實(shí)驗(yàn)中用過(guò)的吸頭、擴(kuò)增完畢的離心管、標(biāo)本和其它廢棄物品一同滅菌后丟棄于地點(diǎn)。
試劑使用前應(yīng)在室溫下充分融化并混勻。
